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如何解決在攻擊菌製備過程中出現的問題

時間:2019-05-14 10:19來源: 作者:raybey雷竞技官网 點擊: 次
用原來的傳代法製備的攻擊菌不但菌種的消費大，而且因傳代培養基的不同而各批間的效價檢測結果會有差異。而液氮保存攻擊菌解決了以上的問題。自增壓液氮罐

試驗表明，將攻擊菌複蘇、傳代（3～9代）、分裝並保存在液氮中，攻擊菌仍然保持原有的生物學特性，符合《中華人民共和國藥典》〔K〕中攻擊菌的LD50為100~1000/MLD的要求，可用於無細胞百日咳效力檢定。

且有較好的穩定性，該法製備的攻擊菌用於檢定可減少人力、物力並節省時間，降低生產成本，提高工作效率，並能使每批的檢定結果不因攻擊菌的變化而受影響。因同批製備的攻擊菌支間差異不顯著，從而更能準確地反映製品的真實效價結果。

在攻擊菌製備過程中，通過多次反複試驗取得了一些經驗，現表述如下：

1、在製備過程中攻擊菌的濃度測定非常重要，製備過程嚴格控製不受汙染，而且必須純菌檢查合格；

2、要注意在放入液氮前，一定要先緩凍，慢速冷卻會有充分的時間使細胞內的水分向外滲出達到平衡，快速冷卻沒有充分的時間使細胞內的水分向外滲出、脫水，加速細胞內冰晶增大，使細胞處於損傷狀態或潛在的損傷狀態；自增壓液氮罐

3、快速加溫融化不會在解凍過程中其冰晶損傷細胞，因此解凍時一般在3 分鍾左右為宜。在生產實踐中需不斷積累經驗、掌握操作技能，為提高製品質量，在攻擊菌的應用上尚有待進一步改進。